2022-04-15
前 言 很多小伙伴做WB时,问蛋白定量需不需要做?做了定量,内参还是不齐,蛋白定量准不准?带着这些疑问,小编带大家梳理一下WB的蛋白定量。为什么要进行蛋白定量? WB实验需要对样品总蛋白进行定量,主要目的是对样品进行均一化处理,也就是使各个泳道蛋白总上样量一致。 特别提醒这里的总上样量一致,是以质量单位上样(ug/孔)而不是以体积单位上样(ul/孔)。 举...
2022-03-03
针对不同的实验研究,市面上的RIPA裂解液根据去污剂种类及组分的不同分为强、中、弱等几类,但RIPA裂解液并不一定能满足你的实验需求。RIPA 裂解组织或细胞会产生可溶性组分和不可溶性组分,并且在不可溶组分中仍存在蛋白。不可溶组分中可能含有细胞骨架、细胞外基质的蛋白成分以及部分膜蛋白、核蛋白等,这部分蛋白的缺失可能会导致后续实验产生不可信、不稳定结果。RIPA buffer solubili...
2019-12-18
通常在胞质胞核分离之后我们会使用一些已经明确定位于细胞核和细胞浆上的蛋白(标记物)作为对照,以检测胞质胞核组分是否分离干净。Yon-Sik Choi,Moleculaer Biosystems,2011当我们使用组蛋白检测胞核组分与胞质组分是否存在交叉污染时,由于胞质中线粒体的存在,胞质中也会检测到组蛋白,从而会让研究者误认为胞核组分与胞质组分存在交叉污染。所以当检测胞质胞核组分间的交叉污染...
2019-12-18
前 言 做WB的小伙伴都会用到蛋白Marker。关于蛋白Marker,小编经常接到技术咨询电话如何选择蛋白Marker,蛋白Marker条带不准,Marker条带消失、弥散,Marker条带能不能曝光出来……等问题。今天小编就带大家从以下几个方面来详细了解一下蛋白Marker。蛋白Marker的定义 蛋白Marker:即蛋白分子量标准,是一些已知分子量的蛋白...
2019-12-18
各位小伙伴们还在为膜蛋白提取发愁吗?吃不下,睡不香,提了半天浓度低,WB没条带,提了半天污染严重,降解条带惨不忍睹!也是没sei了!现在Invent为您隆重推出新的解决方案!现在您无需匀浆,无需超高速离心,无需自配裂解液,仅需离心!就可得到细胞核,细胞质,细胞器,质膜各个组分!对,您没有看错,去掉各种复杂操作,仅需45分钟即可完成膜蛋白提取!不论下游您做WB,SDS,ELISA,IP,2D,...